熒光顯微鏡是對這類物質進行定性和定量研究的工具之一
點擊次數(shù):887 更新時間:2020-09-10
熒光顯微鏡是以紫外線為光源,用以照射被檢物體,使之發(fā)出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等。細胞中有些物質,如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經紫外線照射亦可發(fā)熒光,熒光顯微鏡就是對這類物質進行定性和定量研究的工具之一。
反光鏡的反光層一般是鍍鋁的,因為鋁對紫外光和可見光的藍紫區(qū)吸收少,反射達90%以上,而銀的反射只有70%;一般使用平面反光鏡。
專為熒光顯微鏡設計制作的聚光器是用石英玻璃或其他透紫外光的玻璃制成,分明視野聚光器和暗視野聚光器兩種。還有相差熒光聚光器。
1.明視野聚光器在一般熒光顯微鏡上多用明視野聚光器,它具有聚光力強,使用方便,特別適于低、中倍放大的標本觀察。
2.暗視野聚光器暗視野聚光器在熒光顯微鏡中的應用日益廣泛。因為激發(fā)光不直接進入物鏡,因而除散射光外,激發(fā)光也不進入目鏡,可以使用薄的激發(fā)濾板,增強激發(fā)光的強度,壓制濾板也可以很薄,因紫外光激發(fā)時,可用無色濾板(不透過紫外)而仍然產生黑暗的背景。從而增強了熒光圖像的亮度和反襯度,提高了圖像的質量,觀察舒適,可能發(fā)現(xiàn)亮視野難以分辨的細微熒光顆粒。
3.相差熒光聚光器相差聚光器與相差物鏡配合使用,可同時進行相差和熒光聯(lián)合觀察,既能看到熒光圖像,又能看到相差圖像,有助于熒光的定位準確。一般熒光觀察很少需要這種聚光器。